1.商品介紹(原理,技術(shù)優(yōu)勢,應(yīng)用場景)
激光共聚焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscopy, LSCM)是一種高分辨、三維、非侵入式的成像技術(shù),廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、材料科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究。其核心優(yōu)勢在于通過“共聚焦”原理,有效排除離焦光干擾,從而顯著提高圖像的清晰度和對比度。
(1)激光共聚焦顯微鏡的基本原理
共聚焦技術(shù)
點(diǎn)光源照明:使用激光作為點(diǎn)光源,通過照明針孔聚焦后照射樣品,僅激發(fā)焦平面上一個(gè)微小區(qū)域。
空間濾波:激發(fā)出的熒光信號沿原路返回,經(jīng)過探測針孔后由光電倍增管(PMT)或高靈敏度探測器接收。非焦平面的光被針孔屏蔽,僅焦平面的光信號被有效收集。
逐點(diǎn)掃描:通過掃描振鏡系統(tǒng),激光束在樣品表面逐點(diǎn)、逐行掃描,形成二維圖像。
三維成像:通過Z軸步進(jìn)馬達(dá)或壓電陶瓷驅(qū)動樣品或物鏡,沿光軸方向采集不同焦平面的二維圖像,再經(jīng)計(jì)算機(jī)重建為三維結(jié)構(gòu)。
(2)技術(shù)優(yōu)勢
高分辨率:橫向分辨率可達(dá)120~200 nm,軸向分辨率可達(dá)500 nm左右,遠(yuǎn)超傳統(tǒng)熒光顯微鏡。
高對比度:有效消除背景噪音和離焦光干擾,顯著提高圖像對比度。
非侵入式:對活體細(xì)胞和組織損傷極小,可實(shí)現(xiàn)長時(shí)間動態(tài)觀察。
多色熒光成像:可同時(shí)使用多種熒光探針,進(jìn)行多通道成像和共定位分析。
(3)應(yīng)用場景
生命科學(xué):細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)三維重建、細(xì)胞器動態(tài)追蹤、蛋白質(zhì)定位、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度動態(tài)監(jiān)測、pH值變化、細(xì)胞凋亡過程、細(xì)胞遷移與侵襲研究。
神經(jīng)科學(xué):神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)三維重建、突觸結(jié)構(gòu)觀察、神經(jīng)元可塑性研究、腦組織切片高分辨率成像。
發(fā)育生物學(xué):胚胎發(fā)育過程實(shí)時(shí)追蹤、細(xì)胞命運(yùn)決定、器官形成機(jī)制研究。
醫(yī)學(xué)研究:腫瘤微環(huán)境研究、藥物作用機(jī)制、組織病理學(xué)分析、腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制。
材料科學(xué):材料表面三維形貌與粗糙度分析、微納結(jié)構(gòu)表征、材料表面缺陷檢測、熒光材料性能評估。
藥物研發(fā):藥物在細(xì)胞內(nèi)分布、到藥物載體(如納米顆粒、脂質(zhì)體)的細(xì)胞攝取與釋放過程、藥物毒性評估。
2.結(jié)果案例

3.儀器參數(shù)
技術(shù)參數(shù)
Technical Parameters
放大倍數(shù):12.5-40000倍
載物臺:電動載物臺,行程130 mmx85 mm
橫向分辨率:120nm
觀察方式:明場、高級暗場、偏光觀察方式
4.送樣要求
(1)菌液/污泥/污水類樣品
樣品量:5000rpm離心10min,可得到綠豆大小沉淀,(1.5 mL離心管)大小的菌體沉淀
②細(xì)菌類需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸。
③蛋白/多糖類染色,一般加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,樣品不和冰袋接觸。
④污泥類樣品可以進(jìn)行冰切或者刀切.
(2) 樣品處理方法(生物膜)
①樣品量:金屬/瓷磚/巖石等塊體類建議長寬高尺寸不超過1cm,薄膜類直徑尺寸不超過2cm;且均要求樣品表面平整,需要標(biāo)出拍攝面。
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸③若在爬片上培養(yǎng)生物膜,可將爬片粘于培養(yǎng)皿底部充滿培養(yǎng)基,封口膜密封完全,再4度保存。
(3)植物類
①植物類樣品可進(jìn)行簡單冰切及刀切,軟化等特殊類請走病理組織切片測試項(xiàng)目②一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸③做過的植物類樣品淀粉、葉片、根、莖,擬南芥等。